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你能區(qū)分什么時候需要構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株嗎?

時間:2019/6/6閱讀:394
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實驗室里大家都埋頭做實驗,可為什么老板每次都罵我們,你都快 30 的人了這也不會那也不會,白長這么大了,栽培了你那么多年到頭來啥也指望不上。對此,我深感委屈,那個細胞我養(yǎng)了那么久,它還是那樣衣來伸手飯來張口,我有怪過誰么?

首先,這么大的細胞了,除了要自己學(xué)會傳代之外,鄙人對你們還有更高的要求,你該學(xué)會自己做實驗了。

非常好,你能區(qū)分什么時候需要構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株嗎?

細胞:需要構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株的,有這些類型:

1. 長期在目的細胞中研究基因功能;

2. 部分蛋白半衰期極長,瞬時 RNA 只能干擾表達,無法去除已經(jīng)表達的目的蛋白,想要實現(xiàn)更好的基因干擾效果;

3. 想要實驗更,篩選拷貝數(shù)適量的細胞進行實驗研究;

4. 需要用誘導(dǎo)表達系統(tǒng)的,主要是一些致死基因或者是需要時空表達的;

5. 需要用細胞做動物實驗的,比如裸鼠成瘤等。

 

以下實驗就不需要構(gòu)建穩(wěn)定株:

1. 希望迅速觀察目的基因過表達或者干擾效果;

2. 2~4 天的瞬時表達已經(jīng)可以達到具體的實驗?zāi)康?,比如檢測兩個外源轉(zhuǎn)染的目的蛋白之間的相互作用;

3. 細胞個體差異對實驗結(jié)果有影響。

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