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圓二色光譜檢測蛋白質(zhì)二級(jí)構(gòu)象的操作方法

   2020年01月14日 10:24  
  【儀器網(wǎng) 使用手冊(cè)】圓二色光譜研究蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)、構(gòu)象變化以及其他手性化合物結(jié)構(gòu)的常用方法,用圓二色光譜檢測蛋白質(zhì)二級(jí)構(gòu)象的操作方法是研究人員都需要掌握的。下面就簡單介紹一下應(yīng)該如何操作圓二色光譜儀。
 
  1.準(zhǔn)備
 
  為避免圓二色光譜儀強(qiáng)度隨溫度而發(fā)生變化的變化,應(yīng)安裝在空調(diào)室中,而且還需要光源(Xe燈)的冷卻用水(流量為2.0L/min)
 
  為了防護(hù)由氙燈所產(chǎn)生的臭氧化光學(xué)系統(tǒng)的腐蝕,還得需要流動(dòng)干燥的氮?dú)?2-5L/min)
 
  需要透光率好、應(yīng)變小的高品質(zhì)石英玻璃樣品池。
 
  2.樣品制備
 
  樣品制備需要保證蛋白的純度和透明度,避免含有光吸收的雜質(zhì)。
 
  緩沖液可選擇透明度較高的溶液。
 
  3.開機(jī)
 
  打開高純氮?dú)?,通入光路。打開計(jì)算機(jī),進(jìn)入操作界面,設(shè)置相關(guān)參數(shù)開啟氙燈,等約30 min,待儀器充分預(yù)熱后,方可使用。
 
  4.測試
 
  將光路徑為1 cm的樣品池放入樣品室中,進(jìn)入測試界面,輸入測試參數(shù):靈敏度1000 mdeg;掃面范圍350-200 nm;掃速50 nm/min;響應(yīng)時(shí)間2s;響應(yīng)波長寬度1.0 nm;掃描次數(shù)1次。先測試蒸餾水背景,再分別測試配制的兩份溶液。然后進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。
 
  5.關(guān)機(jī)
 
  打開樣品室,取出樣品池;退出操作界面,關(guān)閉氙燈;關(guān)閉氮?dú)猓P(guān)閉主機(jī)電源;關(guān)閉計(jì)算機(jī)和打印機(jī);清洗樣品池。

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