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儀器網 島津】島津云學院丨課后答疑系列
液相色譜篇
“島津云學院”系列開播以來，得到了眾多用戶的觀看和支持。在直播互動交流中，收到了很多提問，島津十分重視各位用戶提出的問題，今天將開啟島津云學院答疑系列，為大家作詳細解答！
★請問老師一般液相廢液怎么處理？
答：需要明確的是，液相
色譜的廢液中含有大量的有機溶劑以及所測試的樣品，大部分情況下是有毒有害的，因此不能直接傾倒至環(huán)境中，或者流入實驗室下水道中，需要集中處理。一般而言，可以根據不同的情況進行處理：
1、如果廢液量較少：如分析型色譜的廢液，可先行收集，然后等待集中處理(尤其是含有劇毒成分的)，比如尋找專業(yè)的廢液回收機構；如果所在單位/機構不支持集中處理，則可以找安全的地方焚燒或填埋(含酸的需用廢堿中和，含鹽的可以直接倒掉)。
2、廢液量很大：如制備色譜的廢液，則考慮通過精餾系統(tǒng)，將廢液分餾后再次使用。
3、也可以通過“循環(huán)閥”，將未污染的流動相再次回收利用。如島津針對分析型液相和制備型液相都可以提供相應的“溶劑循環(huán)閥”，將分析過程中未受到污染的流動相，如色譜峰之間平直的基線(僅限于等度條件下)回收至溶劑瓶中，將能夠大大提升溶劑使用效率，降低實驗室成本。
★新買色譜柱如何進行測試？
答：對于液相色譜柱來講，拿到一根新的色譜柱，先測柱效、拖尾因子、柱壓(減去系統(tǒng)壓力)，并記錄結果。
之后使用過程中應定期測試，追蹤色譜柱性能。因不同類型色譜柱差別較大，因此對于所使用的方法，請根據說明書上的液相條件和測試樣品進行，同時需要確保儀器的狀態(tài)正常。
★色譜柱用什么沖洗？
答：反相與正相體系清洗方式有所不同：
反相色譜柱
1、日常清洗：10%甲醇水(去除極性大的雜質)→純甲醇(去除非極性雜質)。
2、流動相中含有
離子對試劑：50%有機溶劑(10倍柱體積)??%有機溶劑(20倍柱體積)?%有機溶劑(20倍柱體積)→保存。
3、生物樣品(蛋白質/多肽)污染的色譜柱：B 5% →B 100%的梯度洗脫×3次(A：0.1%TFA B：0.1%TFA in CH3CN)?%有機溶劑(20倍柱體積)→保存。
正相色譜柱
親水性雜質吸附太強，常規(guī)清洗效果不明顯，可以逐級增加洗脫強度，每級至少確保10倍柱體積。
I級：100%正己烷
II級：100%乙酸乙酯
III級：50%三氯甲烷-50%甲醇
注意：回歸到初流動相條件時，請務必先用異丙醇過渡。
★用反相色譜的液相系統(tǒng)可以跑正相嗎？剛剛老師提到用異丙醇沖洗管路，那我跑完反相的用異丙醇沖洗是不是就可以跑正相了？
答：一般來講，當把一臺液相色譜儀即當作正相色譜用，也當做反相色譜用的時候，在兩個不同分析模式之間切換時需要用異丙醇做充分的過渡(比如通宵低流速異丙醇沖洗管路)，其主要是利用異丙醇可以分別與正/反相溶劑互溶的特性，避免流動相殘留造成的影響。
但有一點需要注意的是，所使用的液相色譜儀是否適用于正相溶劑。通常液相色譜儀的主要設計目的是適用于反相體系使用，因此在使用正相體系前，好與供應商確認，尤其是使用特殊溶劑前(如HFIP，DMF等)。
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