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福爾馬林-EDTA脫鈣液操作步驟

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  【信息說明

  產(chǎn)品名稱:福爾馬林-EDTA脫鈣液

  供應(yīng)商:古朵生化試劑廠家

  規(guī)格:500ml

  分類:脫鈣液

  儲存條件:室溫,12個月

  用途:組織脫鈣,螯合脫鈣劑

  注意事項:主要由EDTA、福爾馬林等組成。相對于常規(guī)EDTA脫鈣液,該試劑脫鈣后對組織結(jié)構(gòu)損害小,但脫鈣速度更慢。

 

  【自備材料

  1、PBS

  2、蒸餾水

  3、加熱裝置或微波爐

 

  【操作步驟

  福爾馬林-EDTA脫鈣液操作步驟主要流程如下:

  1、骨組織脫鈣時,取材不易過厚。

  2、組織固定后,用PBS清洗。

  3、組織用蒸餾水洗清洗。

  4、組織轉(zhuǎn)移至福爾馬林-EDTA脫鈣液中,脫鈣10~30天或更長時間。如果想加快脫鈣速度,可以置于37℃進行脫鈣。如果必要,更換新的EDTA脫鈣液繼續(xù)脫鈣,多數(shù)組織脫鈣2周~3個月即可,每周更換一次,直至終點。亦可采用微波快速脫鈣法:微波爐設(shè)在200W左右的檔位,加熱,依據(jù)組織厚度和密度重復(fù)3~5min,中間間隔3~5min。

  5、用蒸餾水沖洗數(shù)次。

  6、常規(guī)脫水、包埋。

 

  【注意事項

  1、厚度5mm的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣10~30天即可。

  2、適當(dāng)加溫能加快脫鈣的速度,一般不應(yīng)超過37~40℃,溫度過高容易使骨組織造成松散解體,尤其不可大于60℃。

  3、脫鈣應(yīng)*,防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應(yīng)控制在不影響組織切片的同時盡量縮短脫鈣時間,以免脫鈣過長引起組織損害。

  4、脫鈣用具避免使用金屬容器,盡量使用玻璃容器。

  5、骨組織脫鈣應(yīng)先固定后脫鈣或脫鈣固定同時進行,不應(yīng)先脫鈣后固定,以便減少組織的損傷程度。

  6、每隔一段時間檢測一次脫鈣程度,脫鈣過度會增加組織的損傷程度,影響染色結(jié)果。

  7、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

  【組成說明

  福爾馬林-EDTA脫鈣液主要由福爾馬林、EDTA等組成,pH值約為7.2~7.4,相對于常規(guī)EDTA脫鈣液,該試劑脫鈣后對組織結(jié)構(gòu)損害小,但脫鈣速度更慢。

 

  【簡介說明

  在組織切片過程中,一些組織內(nèi)含有骨質(zhì)或鈣化灶時,含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因為鈣和石蠟之間的密度不同,較難切出完整的切片。對含鈣組織固定之后,再進行脫鈣或二者同時進行。然后進行下游操作如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。

  用于脫鈣的試劑很多,脫鈣劑包括有機酸、無機酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解法脫鈣。EDTA是一種相對較好的螯合脫鈣劑,對組織結(jié)構(gòu)影響小,可以較好的保存組織的某些酶類,經(jīng)EDTA脫鈣后的組織可以進行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢,一般脫需要數(shù)周至數(shù)月。

 

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