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流式細(xì)胞儀的流動(dòng)室維護(hù)和保養(yǎng)

   2016年10月21日 14:46  
  流式細(xì)胞儀(Flow cytometer)是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng)分析和分選的裝置。它可以快速測(cè)量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把的細(xì)胞亞群從中分選出來(lái)。多數(shù)流式細(xì)胞計(jì)是一種零分辨率的儀器,它只能測(cè)量一個(gè)細(xì)胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標(biāo),而不能鑒別和測(cè)出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說(shuō),它的細(xì)節(jié)分辨率為零。
  
  了解如何正確地維護(hù)和保養(yǎng)流動(dòng)室,可zui大化延長(zhǎng)流動(dòng)室的性能和使用期限。而不正確的使用和維護(hù),則可能產(chǎn)生不正確的讀數(shù)和數(shù)據(jù),而且會(huì)使得你不停呼叫工程師甚至更換流動(dòng)室或光路。
  
  一、需避免的化學(xué)物質(zhì)
  
  目前大部分流動(dòng)室都是由石英或熔融石英制作而成,故需避免pH值大于9.5的堿性溶液非常重要。這些溶液可能腐蝕石英,使其變毛糙,影響光學(xué)性能。一旦使用過堿性溶液,在流動(dòng)室的通路上可能會(huì)看到一些被腐蝕的條紋,如果這些條紋剛好位于激光器檢測(cè)點(diǎn),那么就可能影響檢測(cè)準(zhǔn)確性。
  
  二、如何避免結(jié)晶
  
  避免結(jié)晶很重要。為了避免流動(dòng)室內(nèi)液體結(jié)晶,需經(jīng)常用水沖洗。在跑完緩沖液或生理鹽水之后,尤其是高pH值的溶液后,*沖洗十分必要。有些流動(dòng)室內(nèi)部會(huì)包被一些特殊材料,以防止真菌或結(jié)晶生長(zhǎng)。
  
  三、清洗
  
  清洗流動(dòng)室和光路連接器對(duì)于任何流式細(xì)胞儀的正確運(yùn)行都十分重要。其中zui重要的一點(diǎn)就是別讓流動(dòng)室的液體干掉,而含有鹽分、蛋白或其它固態(tài)溶解物的液體,均可能損傷液路。
  
  的清潔方式就是用充滿10%表面活性劑的針頭連接流動(dòng)室,將活性劑注入流動(dòng)室,多次注射后,將液體留在流動(dòng)室內(nèi)至少2小時(shí)。zui后關(guān)機(jī)前,流動(dòng)室必須*用蒸餾水充滿。
  
  如果流動(dòng)室只是過夜,第二天馬上就用,那么可以用buffer充。
  
  如果要過一個(gè)周末或長(zhǎng)時(shí)間不用,那么建議使用蒸餾水或20%乙醇充。
  
  四、操作和使用中的注意事項(xiàng)
  
  1.光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件,暴露的較強(qiáng)的光線下以后,需要較長(zhǎng)時(shí)間的“暗適應(yīng)”以消除或降低部分暗電流本底才能工作;另外還要注意磁屏蔽;
  
  2.光源不得在短時(shí)間內(nèi)(一般要1h左右)關(guān)上又打開;使用光源必須預(yù)熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常;
  
  3.液流系統(tǒng)必需隨時(shí)保持液流暢通,避免氣泡栓塞,所使用的鞘流液使用前要經(jīng)過過濾、消毒;
  
  4.注意根據(jù)測(cè)量對(duì)象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)、放大器的類型等;
  
  5.特別強(qiáng)度每次測(cè)量都需要對(duì)照組。

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